流式细胞技术常见问题

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已经标记了抗体的样品可以涡旋振荡吗？
是的，可以！但是我们建议短暂涡旋振荡，这样对细胞活性也有帮助的。
收到抗体或重组蛋白后我可以涡旋振荡已达到混匀的目的吗？
我们不建议您对抗体和重组蛋白（包括液体形态的产品）进行涡旋振荡，因为较为剧烈的涡旋振荡会影响产品的稳定性，会对其功能活性造成一定的影响。此外，由于运输过程中抗体和重组蛋白会粘附在管壁和盖子内侧，所以我们建议您收到抗体后和使用前高速离心30秒左右使抗体回归包装管底部。
细胞内因子流式检测实验中加入莫能霉素和布雷菲德菌素有什么用途呢？
莫能霉素（Monensin；cat.00-4505）和布雷菲德菌素（Brefeldin A；cat. 00-4506）是流式检测刺激活化的细胞因子所必不可少的材料。他们主要通过阻止高尔基体分泌细胞因子达到阻止蛋白转运的效果，从而有利于流式细胞技术检测细胞分泌的细胞因子。
做流式细胞实验的时候如何区别活细胞和死细胞呢？
您可以使用7-AAD活性染料（cat. 00-6993）或PI 染色液（cat. 00-6990）。PI和7-AAD会与死细胞裸露的DNA结合，从而对死细胞进行标记，而不会与活细胞结合。当您实验中需要使用活性染料标记死细胞同时又要对细胞内抗原进行标记的时候，我们建议您使用可固定的活性eFluor 450, 660, or 780。详细信息请联系我们技术支持。
流式细胞技术检测不同类型细胞亚群的时候通常用哪些抗体进行标记呢？
您可以索取Human CD Poster和Mouse CD Poster，它会为您提供最专业的建议和产品。
什么是荧光补偿，为什么必须调荧光补偿？
荧光补偿是多色流式细胞技术中为了不同荧光物质之间发射光谱的重叠部分所做的技术调节，其目的是降低不同荧光物质之间的干扰，使实验结果客观可信。例如，FITC发射光谱波长范围很广，会有一部分漏入PE荧光探测器，最终导致流式细胞仪记录了一群错误的PE阳性细胞群。为了避免该错误，就应该调节荧光补偿，详细调节方法请参考：http://www.drmr.com/compensation/index.html.
此外，表达丰度较低的抗原或者稀缺细胞的补偿调节是个大问题，我们推荐您选用OneComp eBeads （cat#01-1111-42）进行调节，详细信息请参考：http://www.laizee.com/news/view/id-47.html
做多色流式细胞染色的时候如何选择荧光？
做多色流式细胞实验的时候选择抗体荧光是比较关键的问题之一，实验者可以根据荧光染料的激发波长、发射波长及抗原表位丰度进行选择；详细资料请参考“实验方案”和“荧光染料表”。如果您还无法选择，欢迎您致电莱兹生物或发邮件tech@laizee.com。

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