方案A：组织培养细胞的制备。方案B：淋巴组织细胞制备。方案C：非淋巴组织细胞制备。方案D：全血PBMC的分离。小贴士1、流式细胞仪检测需要将细胞制备成单细胞悬液。2、避免细胞成团，以免堵塞流式细胞仪。3、实体组织制备单细胞悬液需要物理方法分离或酶消化法进行，具体组织的方法，依照经验来进行。方案A: 组织培养细胞的制备实验材料：Accutase™ 酶细胞分离培养基 (eBioscience C...

试剂准备:流式染色缓冲液 (Flow Cytometry Staining Buffer) :产品编号TNB-4222-L50012x75 mm 圆底流式管或 96孔圆底微孔板 染色流程:1. 制备单细胞悬浮液，用流式染色缓冲液调整浓度至2 x 10 7- 2  x 10 8 cells/mL。2. 每管（或孔）加50 µL 细胞悬浮液。3. 加推荐量的抗体到样品里，细胞悬浮液+抗体的最终体...

肿瘤免疫（I-O，Immuno-Oncology）治疗是指应用免疫学原理和方法，提高肿瘤细胞的免疫原性，激发和增强机体抗肿瘤免疫应答，从而抑制肿瘤的生长。

ELISPot操作流程：1. ELISPOT包被2. 每孔加 入20μl的70％乙醇预湿PVDF膜、甩干。用无菌PBS洗涤，每孔加入100μl， 洗涤2次去除乙醇。用灭菌PBS稀释包被抗体，每孔加 入100μl已稀释好的包被抗体(终浓度10μg/ml)到各实验孔。4°C包被过夜或室温包被2小时。2. 封闭倾倒包被液，用无 菌PBS洗涤3次。最后一次，在灭菌的吸水纸上扣干。每孔加入200μl细...

Human IFN-γ ELISpot操作指导A. 准备和预包被板的封闭（无菌操作）1． 从密封的包装袋中拿出ELISpot板，用无菌PBS洗4次（200?l/孔）。2． 用10%血清的完全培养基封闭（200?l/孔），室温孵育30分钟。B. 细胞的孵育（无菌操作）1． 倒掉培养基，加入细胞悬液并加入刺激因子，如抗原（终体积100-150?l/孔）。用mAb CD3-2 为阳性对照。2． 把...

Human IFN-γ/IL-2 Fluorospot操作指导这个过程是利用两种荧光染色检测IFN-γ和IL-2，这个过程也可以调整为单染，可以用1-D1K或者IL2-I/249包被抗体包被。A 准备板子并双荧光包被（无菌操作）1． 用无菌PH7.4 PBS稀释1-D1K和IL2-I/249包被抗体，终浓度为15?g/ml。2． 从密封的包装袋中拿出Fluorospot IPFL板，每孔加入...

研究记忆B细胞的有效方法是进行反向抗原特异性FluoroSpot分析。

人类和小鼠IFN-γ ELISpot可以在疫苗研究中监测肽特异性T细胞应答，例如用于SARS-CoV-1研究中(Li et al,J Immunol. 2008)

在过去十五年间，多重检测技术以其使用少量样本实现多指标高通量检测而成为发表文章中的宠儿，除了血清、血浆以及细胞培养上清外，越来越多的样本类型被证明适用于该检测技术。小编根据赛默飞官网整理了部分最新发表的ProcartaPlex多因子实验技术的相关文献及使用的试剂盒货号、检测物种、检测样本类型等以供参考，过往年份查阅网址见文末。2023年赛默飞多因子技术应用文献Refercences在制定学习...

ProcartaPlex参考文献

正确的样本收集整理方法，是实验成功至关重要的步骤。目前可以检测样本类型有: 细胞上清、血清、血浆。尽管其他生物学样本没有经过验证，但是理论上也可以检测，这些样本包括: BAL，唾液，CSF，组织匀浆液和尿液。下面我们针对几种常见样本的收集、保存方法：1、血清全血室温（20-25 °C）凝固20-30min；室温1,000 x g 10min；收集上清，或者选择使用血清分离器；可选：如果样本是...

ProcartaPlex产品应用——呼吸重症：利用ProcartaPlex Panel研究呼吸危重症相关免疫生物标志物，可以获得对患者免疫状况的整体认知。

2019新型冠状病毒（2019-nCoV）是目前已知的第7种可以感染人的冠状病毒，其余6种分别是HCoV-229E、HCoV-OC43、HCoV-NL63、HCoV-HKU1、SARS-CoV和MERS-CoV。

实验材料：　　Mouse, Rabbit 或Goat IgG TrueBlot™　　TrueBlot™ Ig IP 微球 or Protein A 或 G 微球　实验设备：　　SDS-PAGE电泳及转膜相关设备和缓冲液；　　微量移液器；　　摇床；　　PVDF或nitrocellulose膜；　　WB结果检测设备及底物实验步骤　　1）. 免疫共沉淀（IP）和SDS-PAGE电泳　　(1) 细胞...

问题可能原因验证或解决办法          无信号一抗和二抗不匹配二抗需和一抗宿主的物种相同（如一抗来自兔，二抗为抗兔抗体）。没有足够的一抗或二抗结合目标蛋白使用高浓度抗体，延长4℃孵育时间（如过夜）。封闭剂与一抗或二抗有交叉反应使用温和的去污剂如吐温-20，或更换封闭剂（常用的脱脂奶粉、BSA、血清或明胶）。一抗不识别检测物种的蛋白参照说明书，比对免疫原序列和蛋白序列以确保抗体和目的蛋白...

酶联免疫吸附检测（ELISA）技术是特定靶标蛋白质定量的金标准，提供快速、稳定且易于分析的结果。在这里，我们提供5个简单的步骤，用于在运行ELISA时获得稳定且准确的结果。