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高通量核酸检测定量研究的有利“武器”——QuantiGene? 2.0 Assays

Date:Nov 12th, 2012 Views:15,931

  您还在为抽提DNA或RNA等繁琐的实验发愁吗?

  您还在为RNA容易降解难以检测等问题头痛吗?

  您还在为基因芯片实验结果无相关验证实验二烦恼吗?

  …………

  QuantiGene® 2.0 高通量核酸定量研究系列试剂盒为您解决以上问题。

  QuantiGene® 2.0 系列产品是世界著名基因芯片制造商Affymetrix 公司旗下Panomics的畅销产品。该试剂盒采用Branched DNA(b-DNA)技术,可以快速方便的完成核酸的精确定量检测。它克服了传统的real-time PCR(或者q-PCR)技术中的种种不确定因素(如抽提核酸的损失、酶降解、操作次数过多导致的误差等),无需抽提纯化RNA,无需反转录,无需PCR扩增,对样本量下限无严格要求(只需mRNA拷贝数在检测范围内),只需将样本用对应的裂解液裂解后,经探针杂交与信号放大即可迅速得到比real-time PCR更加精确的定量结果。在检测样品上,除了常规检测的样品如细胞、组织、样本外,该技术对血液样本与福尔马林浸泡、石蜡包埋切片(FFPE)同样具有极高的精确度、准确性与重复性。

QuantiGene Real-time PCR比较:

  目前,该技术主要应用于两个平台:

1、 QuantiGene® 2.0 Assay

  QuantiGene 2.0 Assay可检测各种类型样本的miRNA、RNA或DNA。

  实验流程如下:(QuantiGene® 2.0 miRNA Assay为例

优点:

  1) 为客户提供以确定功能的miRNA探针组。

  2) 能有效的避免miRNA抽提的损失(一般抽提方法会损失50%以上)。

  3) 可检测细微的表达差异如10%的基因表达差异,而qPCR只能区分出倍数的变化。可以区分出单个细胞中DNA分子一个拷贝数的差异。

  4) 可区分出miRNA两个碱基的差异。

  5) 对样本进行直接定量分析,并且能够很好地检测FFPE样本,不受H&E染色和福尔马林固定的影响,并可以检测降解的RNA。

  6) 使用人工合成的RNA或者管家基因进行定量。

  7) 能够很好地检测血液样本,不需要降解球蛋白,样本检测用量少,甚至仅用10ul全血就可检测。

  8) 避免了在RNA/DNA抽提,反转录和PCR扩增过程中,人为操作的误差和假阴性和假阳性的结果。

应用领域:

  QuantiGene 2.0技术被广泛地用于信号通路相关蛋白的基因表达定量分析,回顾性临床研究和诊断治疗决策中的FFPE和血液样本的生物标志物的验证,芯片结果的验证,毒理学预测,RNAi干扰效果的检测,DNA拷贝数变异分析。

1、 QuantiGene®  Plex Assay

  QuantiGene® Plex Assay是应用Luminex平台,可以在同一反应孔中同时检测多达36个目标基因,并进行准确定量的一种创新性产品。在一些较难准确定量的样本(如临床收集的FFPE样本和血液样本)中,有着令人瞩目的表现。我们为广大科研用户提供6个物种,250个已验证的蛋白和细胞因子的定量试剂。

  实验流程:

优点:

  1) 在同一反应孔中最多可以做到36种RNA或34种DNA的检测。

  2) 无需样本抽提;可以检测纯化的RNA或DNA,即使是RNA降解,质量较差的样本。

  3) 无需反转录和PCR扩增,避免了这两个过程中造成的假阴性、假阳性和人为误差。

  4) 结果更加精准,极大限度地避免了操作者、工作环境、板间差异所造成的误差。

  5) 免受福尔马林、H&E染色、黑色素、球蛋白或其他一些高表达的蛋白对酶的抑制,所造成的干扰。

应用领域:

  QuantiGene Plex RNA Assay 和 QuantiGene Plex DNA Assays在筛选和准确定量基因标记都有着广泛运用,如信号转导通路的研究,回顾性临床研究和诊断治疗决策中的FFPE和血液样本的生物标志物的验证,芯片结果的验证,毒理学预测,RNAi干扰效果的检测以及DNA拷贝数变异分析。

产品详细信息请咨询莱兹生物。

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