流式一、样品的准备试验一：组织培养细胞的细胞准备材料 AccutaseTM Enzyme Cell 完全培养基（eBioscience Cat.No. 00-4555） 流式细胞仪染色液（eBioscience Cat.No. 00-4222） 15或50ml尖底离心管实验过程1． 对于悬浮培养的细胞，把细胞分装到一个尖底离心管中，对细胞进行计数和活性分析，然后进入步骤3；2． 对于...
细胞表面分子流式检测步骤说明注意事项1． 在使用抗体之前，快速甩动一下，使之聚集到管的底部；2． 荧光标记的抗体应该避光保存在4℃，不要冷冻；3． 当染色的时候，固定或延迟分析可能降低某些抗体的荧光信号。为了得到更好的结果，染色后应该马上分析。过程概述：1． 制作外周血、淋巴组织或者培养细胞的单细胞悬液；2． 细胞染色抗体（包括直接标记抗体和间接标记抗体）；3． 洗涤步骤弃掉所有的为束缚的试...
流式胞内蛋白染色，很关键的一点是需要知道要染的蛋白在哪个位置，这样才能选对操作流程和buffer体系。例如，核内蛋白和大部分分泌蛋白要用eBioscience 的Foxp3/Transcription Factor Staining Buffer Set (eBioscience Cat. No. 00-5523)，而像细胞因子和趋化因子这类分泌蛋白要用Intracellular Fixat...
方案A：细胞悬液的表面抗原染色。方案B：一步法胞内蛋白染色（细胞核）。小贴士：1、流式抗体要储存于避光4度，严格避免冻融。2、流式抗体使用前要离心3min，避免贴壁盖的损失，请勿斡旋混匀。3、避免细胞成团，以免堵塞流式细胞仪。4、eFluor纳米晶体抗体参照该品说明进行改善。方案A: 细胞悬液的表面抗原染色实验材料：15×75mm圆底流式管或96孔板直标一抗或纯化抗体二抗（可选）抗小鼠CD3...
方案A：组织培养细胞的制备。方案B：淋巴组织细胞制备。方案C：非淋巴组织细胞制备。方案D：全血PBMC的分离。小贴士1、流式细胞仪检测需要将细胞制备成单细胞悬液。2、避免细胞成团，以免堵塞流式细胞仪。3、实体组织制备单细胞悬液需要物理方法分离或酶消化法进行，具体组织的方法，依照经验来进行。方案A: 组织培养细胞的制备实验材料：Accutase™ 酶细胞分离培养基 (eBioscience C...
材料针对外周血，组织中红细胞。方法：1、裂解小鼠脾脏红细胞通常一个脾脏使用5mL裂解液，裂解5分钟左右，最长不超15分钟。裂解人类组织同小鼠。裂解小鼠外周血可以按照裂解液与血液体积比10:1的比例来裂解。2、裂解至溶液透亮后加入2倍以上体积的PBS，终止裂解。然后离心，PBS洗涤一次。
以CaspGLOW™ Fluorescein Active Caspase-3 Staining Kit（88-7004）为例。1.根据文献中方法诱导靶细胞凋亡，准备未诱导细胞作为阴性对照，另外一种阴性对照用1ul Z-VAD-FMK 抑制剂制备。2.将细胞加入300ul完全培养基中，浓度为1×106.3.加1ul FITC-DEVD-FMK 在5%CO2 37摄氏度下孵育30~60min....
试剂准备:流式染色缓冲液 (Flow Cytometry Staining Buffer) :产品编号TNB-4222-L50012x75 mm 圆底流式管或 96孔圆底微孔板 染色流程:1. 制备单细胞悬浮液，用流式染色缓冲液调整浓度至2 x 10 7- 2 x 10 8 cells/mL。2. 每管（或孔）加50 µL 细胞悬浮液。3. 加推荐量的抗体到样品里，细胞悬浮液+抗体的最终体...
肿瘤免疫（I-O，Immuno-Oncology）治疗是指应用免疫学原理和方法，提高肿瘤细胞的免疫原性，激发和增强机体抗肿瘤免疫应答，从而抑制肿瘤的生长。
